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適用范圍
適用于飼料中阿那曲唑的檢測。（本實驗樣品采用復(fù)合飼料）
參考標準：《農(nóng)業(yè)部1068號公告-5-2008 飼料中阿那曲唑的測定 高效液相色譜法》。
提取步驟
精QUE稱取5g樣品置于50mL的螺口尖底離心管。
1）加入10mL水，搖勻，靜止10min，加入10mL提取劑，振蕩數(shù)秒，放氣，再次震蕩，放氣，超聲10min，4000rpm下離心10min，移取上清液；
2）再次加入10mL提取劑，振蕩數(shù)秒，放氣，再次震蕩，放氣，超聲10min，4000rpm下離心10min，移取上清液，合并上清液，取5mL上清液置于15mL離心管中，在40℃下氮吹至干，用2mL流動相C溶解待凈化。
SPE凈化步驟
SPE柱：月旭Welchrom® P-SCX；
規(guī)格：60mg/3mL；
活化：依次3mL甲醇，3mL水活化，棄去；
上樣：待凈化液全部上樣，控制流速，不宜過快，棄去；
淋洗：依次3mL0.1mol/L鹽酸溶液，5mL甲醇，棄去；
洗脫：精QUE移取4mL的5%氨化甲醇洗脫，抽干并收集于15mL離心管中；
復(fù)溶：洗脫液于40℃水浴氮吹干，用流動相C定容至1mL，經(jīng)0.22μm有機濾頭，供液相檢測。
注：流動相C：300mL乙腈加水定容至1000mL，在加入5mL磷酸（乙腈-水-磷酸=30:70:0.5）
色譜條件
色譜柱：月旭Ultimate® XB-C18，4.6×250mm，5μm；
流動相：A-水，B-甲醇，C-見2-4（梯度見表1）；
流速：1.000mL/min；
柱溫：30℃；
進樣量：20μL；
檢測波長：220nm。
色譜圖或者加標回收率結(jié)果
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